不同温度和盐度对锯缘青蟹抱卵的影响

1999～2004年分别在浙江温岭、三门和江苏通州等地进行锯缘青蟹生产性育苗，并结合生产实践，开展了不同温度、盐度等对锯缘青蟹抱卵的效果试验，结果表明：青蟹培育池水温15℃时，青蟹可以抱卵，25℃时抱卵情况最佳；盐度20．2时青蟹可抱卵，但优质抱卵率低，盐度升高会改善抱卵质量，25～30是青蟹抱卵的理想盐度。     

青蟹土池大棚越冬试验

严把越冬青蟹质量关；大棚外雨水不进入越冬池；水温控制在7－10℃，换水控制在20％－50％；换水温差不超过1℃；越冬池水面设置漂浮物；水底设置隐蔽物。     

亚硝酸盐急性胁迫对拟穴青蟹相关免疫指标的影响

【目的】探讨亚硝酸盐急性胁迫对拟穴青蟹(Scylla paramamosain)机体免疫力的影响,为拟穴青蟹养殖模式调整与产业化升级提供基础资料。【方法】测定拟穴青蟹在不同浓度亚硝酸盐(0 mg/L、20 mg/L、60 mg/L、100mg/L、140mg/L)胁迫下其组织中碱性磷酸酶(AKP)活力、过氧化氢酶(CAT)活力、丙二醛(MDA)含量在受胁迫48h内的动态变化。【结果】亚硝酸盐胁迫浓度达60mg/L以上时,青蟹肝胰腺及肌肉中AKP活力变化显著,肌肉中AKP活力随时间增加呈先升高后降低趋势,各组织中CAT活力变化也呈先升高后降低趋势,表现出一定的"毒兴奋效应",肝胰腺及鳃中MDA含量则随胁迫时间与胁迫浓度变化呈递增趋势。【结论】亚硝酸盐胁迫可通过破坏组织中非特异性免疫酶类体系运转,加剧组织中脂质过氧化方式导致机体免疫力下降。在拟穴青蟹人工养殖中,将亚硝酸盐浓度控制在20mg/L以下,有助于青蟹养殖模式调整与产业化升级。     

温度骤降对锯缘青蟹可溶性蛋白与可溶性糖含量的影响

锯缘青蟹是生活在河口海区的一种重要经济甲壳动物,其生活的环境温度经常发生温度的骤然增高或降低.本研究采用生物化学的方法对温度骤降后不同时间锯缘青蟹鳃,肝胰腺和肌肉中可溶性蛋白和可溶性糖含量进行测定.结果显示锯缘青蟹可溶性蛋白和可溶性糖含量在骤降温初期(2 h)升高,骤降温2 h后可溶性蛋白虽然呈现波动性变化,但最后出现明显下降;骤降温2 h后可溶性糖含量在鳃中逐渐下降,而在肝胰腺和肌肉中呈现波动性下降.实验结论为锯缘青蟹骤降温初期可溶性蛋白和可溶性糖增高是机体对寒冷应激的一种积极反应,后期下降是生理反应中物质和能量消耗所致.     

Immunorecognition of estrogen and androgen receptors in the brain and thoracic ganglion mass of mud crab, Scylla paramamosain

The brain and the thoracic ganglion of crustacean can synthesize and secrete gonad-stimulating hormone (GSH) which stimulates the maturation of gonad. In the previous experiments, sex steroid hormones (estradiol, testosterone, progesterone, etc.) have been detected from crustacean. However, the feedback regulation of sex steroid hormones on the brain and thoracic ganglion of crustacean has not been reported so far. In the present experiment, monoclonal antibodies were applied to investigate the immunorecognition of estrogen receptor (ER) and androgen receptor (AR) in the brain and thoracic ganglion mass of Scylla paramamosain. The results showed that the distribution of the immunopositive substances of ER and AR was extremely similar. They distributed in the protocerebrum, deutocerebrum and tritocerebrum of the brain, and mainly in protocerebrum. In the thoracic ganglion mass, immunopositive substances distributed in the subesophageal ganglion, thoracic ganglion and abdomen ganglion, and mostly in subesophageal ganglion. Immunopositive substances of ER and AR mostly existed in the cytoplasm of neurons. The present study will provide morphological evidence for the origin and evolution of ER and AR. In addition, the immunoreactivities of ER and AR suggested that the estrogen and androgen may be involved in the feedback regulation of crustacean neuroendocrine.     

铜、锌、镉对锯缘青蟹仔蟹代谢酶活力影响的实验研究

测定锯缘青蟹仔蟹（背甲宽 ３１.０±３．５ ｍｍ;背甲长 ２３．０±２．８ ｍｍ）暴露在次致死浓度的铜、锌、镉离子溶液下 ２４ ｈ后肝胰腺、鳃、肌肉碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、谷雨转氨酶（ＧＰＴ）、谷草转氨酶（ＧＯＴ）的酶活性．结果表明：低浓度重金属使仔蟹酶活力提高,高浓度时又对酶活力有明显的抑制作用．三种金属中,铜、镉对酶活力影响作用较锌显著．三种受试组织中,肝胰腺酶活力最易受重金属影响．     

锯缘青蟹脑的神经分泌细胞

应用组织学方法和免疫组织化学技术研究子锯缘青蟹脑的神经分泌细胞的各类与分布,依据细胞形态、细胞核、细胞质的特征,将脑神经分泌细胞分为4种类型,并绘制了神经分泌细胞的分布示意图。     

拟穴青蟹细丝蛋白C的生物信息学分析及重组表达

为了探讨抗原表位与细丝蛋白C（filamin C,FLN c）结构之间的构效关系，对FLN c进行生物信息学分析及分段重组表达。生物信息学分析结果表明，FLN c二级结构以β折叠及无规则卷曲为主，确定其具有9个结构域，三级结构呈免疫球蛋白样折叠，具有典型的细丝蛋白家族特征。基于生物信息学分析，将拟穴青蟹（Scylla paramamosain）FLN c通过分段原核表达，纯化出带有麦芽糖结合蛋白（maltose binding protein，MBP）标签的重组表达蛋白rFLN c1（AA:1-335）、rFLN c2（AA:336-531）、rFLN c3（AA:532-847）。血清学分析结果显示，rFLN c2与蟹类过敏患者血清IgE结合能力最强，推测此区域含有大部分抗原表位。因此，定位拟穴青蟹FLN c氨基酸336-531结构域为抗原表位优势区，rFLN c2可用于FLN c的晶体学研究。     

拟穴青蟹β-肌动蛋白基因的克隆与分析

β-肌动蛋白广泛存在于真核生物中,在维持细胞结构、细胞运动和细胞分裂等生理活动中发挥着重要作用.运用RACE技术克隆了拟穴青蟹(Scylla paramamosain)β-肌动蛋白基因,并用RT-PCR方法检测该基因在成体各组织中的表达情况.拟穴青蟹β-肌动蛋白cDNA全长1 337 bp,5′端非编码区为67 bp,3′端非编码区为139 bp,开放阅读框1 131 bp编码376个氨基酸.拟穴青蟹β-肌动蛋白与其他节肢动物β-肌动蛋白氨基酸序列的相似性高达98％～99％.系统进化树显示拟穴青蟹β-肌动蛋白基因的分子进化地位与其生物学分类地位一致.半定量RT-PCR分析结果表明,β-肌动蛋白基因在拟穴青蟹视神经节、脑神经节、胸神经节、性腺、鳃、心、胃、肌肉、肝胰腺共9个组织器官中的表达基本一致,具有良好的稳定性.